生理溶液氨基酸分析aTRAQ™试剂盒

仅限研究使用,不可用于诊断过程。

用于生理液体中氨基酸分析 aTRAQ 试剂盒可让您测定生理样品中 45 种氨基酸的含量。本试剂盒为LC/MS/MS 系统配合使用而开发。

  • 单次进样可分析 45 种氨基酸
  • 分析通量高,每份样品的分析时间为 18 分钟
  • 单一操作规程适用于各种生理液体和基质(如血浆、尿液、组织提取物和培养基)
  • 仅需较小样品量,40 µL
  • 作为每次分析中内标,可实现准确且精准的分析鉴定和定量分析
  • 具备广泛的动态范围,LLOQ 和 ULOQ 可达10,000 µM
  • 完整试剂盒包括必需试剂、缓冲液、标准品、对照品和色谱柱
  • 具备添加自定义胺、氨基酸和小肽并生成相应内标的扩展功能
  • 具备执行自动移液步骤的可选功能

状态: 供应中 状态

 

概述

性能更快,准确度更高:

aTRAQ 试剂提供一致的质量标签,有助于某一分子量区域内的氨基酸样品和内标实现 MS/MS 碎裂,并减少干扰。针对每份要进行分析的氨基酸使用内标,从而提高定量分析的精度和准确度;通过比较各氨基酸标准品和样品的保留时间以及分子量,可进行进一步确认。

 aTRAQ 试剂衍生作用的机制如下所示(图 1)。各 aTRAQ 试剂标签都由报告端和活性端(与各氨基酸的伯胺基和仲胺基结合)组成。样品所用报告标签的分子量为 121 amu。内标所用报告标签的分子量为 113 amu。


图 1: 一般标记反应。

标记操作规程适用于各种生理基质,包括血浆、尿液、脑脊髓液和组织提取物。首先将样品 (40 µL) 与磺基水杨酸溶液混合,使蛋白质沉淀。标记反应在碱性 pH 值下缓冲。样品使用 aTRAQ 试剂 Δ8 标记 30 分钟,干燥,然后与使用 aTRAQ 试剂 Δ0 预标记的内标混合。除了同位素位点数量不同以外,这两种 aTRAQ 试剂的结构完全相同。使用三重四极杆质谱仪或可在多反应监测 (MRM) 模式下运行的 QTRAP 系统通过 LC/MS/MS 法对此混合物进行分析。使用加热到 50°C 的 C18 色谱柱执行高效液相色谱法分离。梯度、冲洗和平衡共计耗时 18 分钟(图 2)。使用预定的 MRM 算法可最大程度地提高保压时间,同时监测大量 MRM 转换,从而实现最佳数据质量和重现性。


图 2:典型色谱图。

使用这种方法,无法通过高效液相色谱法区分使用单独标签进行差异性标记的同一种氨基酸,因为标签不同的氨基酸的保留时间完全相同。在 MS/MS 模式下,标签碎片产生报告离子,这些离子经过同位素编码,可产生不同的质量。MRM 转换由标记氨基酸质量和报告离子质量组成,用于区分样品和内标中的同一种氨基酸;使用这些峰面积比计算样品中氨基酸的浓度(图 3)。


图 3:基本方案。

 

套件

 

部件号

套件名称/说明

4442669

aTRAQ 生理溶液 50 试验起始试剂盒
包括除以下物品外的所有耗材:流动相(水和甲醇);按照氨基酸分析生理样品操作规程运行 50 份 aTRAQ 试剂标记样品所需的色谱柱 (4374841)。
还包括以下项:

aTRAQ 生理溶液 50 试验试剂盒 (4442668)
包含足以标记 50 份生理样品的材料与 aTRAQ™ 试剂。

aTRAQs® 未标记标准品 (4442687)
用于测试 aTRAQ 试剂盒的未标记氨基酸混合物和操作规程。足以进行 10 次测试。

别异亮氨酸 (4374875)
可用于测试未标记别异亮氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和正亮氨酸的分离情况。

质控血浆 (4386703)
具有已知氨基酸浓度的血浆样品。可使用生理基质用于测试 aTRAQ™ 试剂盒操作规程。包括具有氨基酸参考范围的数据表。足以进行 75 次测试。

aTRAQ 内标 (4442688)
使用 aTRAQ 试剂 ∆0 标记的氨基酸标准品。将其添加至各 aTRAQ 试剂 ∆8 标记样品中,作为内标使用。包括列出标准品(足够用于 50 份样品的内标)中各氨基酸浓度的分析证书。

 

4442689

aTRAQ 生理溶液 50 试验起始试剂盒(绿)(不包括用户指南)
包括与 aTRAQ 生理溶液 50 试验起始试剂盒 (4442668) 相同的组分,但不包括氨基酸分析生理样品操作规程和快速参考卡。

4374841

氨基酸分析仪 C18 色谱柱
反相(5 µm,4.6mm x 150mm)色谱柱

4442672

aTRAQ 生理溶液 50 试验试剂盒
包含足以标记 50 份生理样品的材料与 aTRAQ 试剂、附带分析证书的 aTRAQ 内标 (4442688) 和快速参考卡。

4442691 aTRAQ 生理溶液 50 试验试剂盒(绿)(不包括用户指南)
包括与 aTRAQ 生理溶液 50 试验试剂盒 (4442672) 相同的组分,但不包括快速参考卡。
4442673 aTRAQ 生理溶液 200 试验试剂盒
包含足以标记 200 份生理样品的材料与 aTRAQ™ 试剂、附带分析证书的 aTRAQ 内标 (4442688) 和快速参考卡。
4442692 生理溶液 200 试验试剂盒(绿)(不包括用户指南)
包括与 aTRAQ 生理溶液 200 试验试剂盒 (4442673) 相同的组分,但不包括快速参考卡。

4442674

aTRAQ 生理溶液标准品
包括以下标准品:

aTRAQ内标 (4442688)
使用 aTRAQ 试剂 Δ0 标记的氨基酸标准品。将其添加至 aTRAQ 试剂 Δ8 标记的各采样样品中,作为内标使用。包括列出标准品中各氨基酸浓度的分析证书。足够用于 50 份样品。

aTRAQ 未标记标准品 (4442687)
用于测试 aTRAQ 试剂盒的未标记氨基酸混合物和操作规程。足以进行 10 次测试。

别异亮氨酸 (4374875)
可用于测试未标记别异亮氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和正亮氨酸的分离情况。

4386703 质控血浆
具有已知氨基酸浓度的血浆样品。可用于测试 aTRAQ 试剂盒和使用生理基质的操作规程。包括具有氨基酸参考范围的数据表。足以进行 75 次测试。
4442688 aTRAQ 内标
使用 aTRAQ 试剂 Δ0 标记的氨基酸标准品。将其添加至各 aTRAQ 试剂 Δ8 标记样品中,作为内标使用。包括列出标准品中各氨基酸浓度的分析证书。足够用于 50 份样品。